研究團(tuán)隊(duì)首先改造了人源尿嘧啶糖基化酶（UNG）的兩個(gè)突變體，獲得了兩種高活性的DNA糖基化酶，分別作用于胞嘧啶堿基的CDG4和胸腺嘧啶堿基的TDG3。隨后，研究團(tuán)隊(duì)將這兩種DNA糖基化酶與nCas9（Cas9，D10A）融合，構(gòu)建了CDG4-nCas9和TDG3-nCas9兩種堿基編輯器，用于在大腸桿菌中進(jìn)行C-to-A和T-to-A的編輯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這兩種堿基編輯器在大腸桿菌中的編輯效率最高分別達(dá)到58.7%和54.3%。

研究團(tuán)隊(duì)針對(duì)Homo sapiens密碼子優(yōu)化版本的CDG4-nCas9和TDG3-nCas9，在HEK293T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了C-to-G和T-to-G的顛換編輯，編輯效率分別達(dá)到38.8%和48.7%。這兩種編輯器的脫靶效果低于常用的胞嘧啶堿基編輯器（BE4max）和糖基化酶堿基編輯器（CGBEs）。研究團(tuán)隊(duì)將這兩個(gè)編輯器命名為DAF-CBE和DAF-TBE，在優(yōu)化后成功實(shí)現(xiàn)了人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（hiPSC）高效編輯。

與現(xiàn)有的引導(dǎo)編輯器或糖基化酶堿基編輯器相比，DAF-BEs具有相當(dāng)?shù)木庉嬓省⒏〉某叽绾透偷拿摪新?，擴(kuò)展了堿基編輯器的編輯類(lèi)型，為工業(yè)菌株鑄造和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域相關(guān)研究提供了新的技術(shù)工具。